Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza

En muchas infecciones virales las secuencias de ADN viral se incorporan a uno de los cromosomas de la célula huésped

La célula replica el ADN viral incorporado junto con el resto de su ADN cada vez que se divide la célula

Cuando se producen nuevos virus a partir del ADN incorporado, estos pueden integrar por error genes humanos en el genoma del virus y se crea un virus recombinante

 Referencias

• http://books.google.com.ec/books?id=uO48-6v7GcoC&pg=PA244&lpg=PA244&dq=ADN+recombinante+en+las+bacterias+de+forma+natural&source=bl&ots=vVqCJPZHRA&sig=WBu36UFESD1uPjQoLyfFckTUlvI&hl=es&sa=X&ei=Ol_BUO3RMI6-9QTI-YCoBw&ved=0CDsQ6AEwAg#v=onepage&q=ADN%20recombinante%20en%20las%20bacterias%20de%20forma%20natural&f=false 
• http://www.news-medical.net/health/Recombinant-DNA-What-is-Recombinant-DNA.aspx

Tecnica de hibridacion en ACV

Hemos empleado la hibridación in situ y microdisección con el tiempo real de RT-PCR para investigar la expresión y el papel que cumple 21-microARN (miR-21) después de un ACV

La hibridación reveló que el miR-21 hizo una regulación positiva de expresión en las neuronas de la zona límite isquémica, y el análisis cuantitativo en tiempo real de RT-PCR reveló que el accidente cerebrovascular aumentó los niveles de miR-21 aproximadamente tres veces en las neuronas aisladas a partir de la zona de frontera isquémica

Según datos científicos la sobreexpresión de miR-21 protege la muerte neuronal isquémica. Estos nuevos hallazgos sugieren que el miR-21 puede ser una molécula terapéutica atractiva para el tratamiento del accidente cerebrovascular.

Articulo completo

• http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20840605

Reaccion en cadena de la polimerasa en un ACV

Los microARN proporcionan un control postranscripcional de la expresión génica y demuestran extensos cambios miARN después de la isquemia cerebral

Desde HSP70 y BCL2 reguladora de apoptosis son los principales protectores contra la muerte celular inducida por el estrés, hemos identificado un miRNA que podrían influir en estas proteínas clave.

miR181 y la lesión cerebral isquémica

Niveles de miARN fueron evaluados por cuantitativos RT-PCR y los niveles de mRNA por RT-PCR

En respuesta a accidentes cerebrovasculares miR-181 aumento en el núcleo, donde mueren las células, pero disminuyo en la penumbra, donde las células sobreviven

Los niveles de miR-181 cambian en respuesta a un accidente cerebrovascular y los niveles de manipulación de miR-181 cambia el volumen del infarto. Reducción de los niveles de miR-181 se asocian con un aumento de GRP78 y Bcl2 y protección de lesión isquémica in vivo e in vitro

En conclusión las miRNAs pueden proporcionar una nueva estrategia terapéutica para la protección de un derrame cerebral.

Articulo completo

• http://journals.lww.com/ejanaesthesiology/Abstract/2012/02001/A11_MicroRNA_181_Influences_Response_to.11.aspx 

Muestra biologica que se recoge para detectar el ACV y pasos para la extraccion de acido nucleico a partir de la muestra

Para este tipo de exámenes específico se recoge una muestra de sangre

La técnica de amplificación de ADN mediante la reacción en cadena de la polimerasa es una técnica que consiste en tratar de replicar una y otra vez un mismo fragmento de ADN

Etapas en la extracción de ADN

1.Lisis de las células

Las sales caotrópicas ayudan a romper la estructura tridimensional de macromoléculas como las proteínas o los ácidos nucleicos consiguiendo su desnaturalización  

2.Degradación de la fracción proteica asociada al ADN

Se consigue mediante la adición de una proteasa 

3.Purificación

Consta de 3 fases:

• Precipitación del ADN: El ADN es insoluble en alcohol, por lo que se puede precipitar etanol frío o isopropanol y recuperar mediante una centrifugación.

• Lavado del pellet: Se realiza con alcohol frío volviendo a centrifugarse

• Recuperación: El sedimento se puede resuspender en agua o tampón Tris Tras sersecado completamente

La confirmación de la presencia de ADN se lleva a cabo mediante electroforesis en un gel
de agarosa y posterior tinción con bromuro de etidio y observación con luz UV  

Estos tres pasos constituyen un ciclo. La repetición de este ciclo unas 40 veces, por ejemplo, permite obtener, como resultado de un experimento de amplificación, millones de copias del fragmento de interés.

Referencias

• http://escuela.med.puc.cl/publ/MedicinaIntensiva/Enfermedad.html 
• http://www.ugr.es/~mgarrido/PCR.htm 
• http://www.microbial-systems.com/web/docs/Newsletter_Microbial_03.pdf

 

Relacion de la traduccion con el ACV

Para la producción de un ACV tiene que haber un estrés oxidativo y según estudios clínicos la estanina reduce el mismo, haciendo que la incidencia de Insuficiencia cardiaca y la isquemia cerebrovascular sea menos probable

A nivel molecular las estaninas inhiben la síntesis de mevalonato, este produce moléculas isoprenoides como el FPP y GGPP que sirven como etiquetas lipídicas para la modificación postraduccional de muchas proteínas inclu

yendo la subgama de proteínas G y pequeñas proteínas unidoras de GTP (Ras, Rho, Rab, Rac, Ralo Rap). Las proteínas Ras y Rho son los principales sustratos de modificación postraduccional por prenilacion. La producción de radicales de oxigeno NADPH oxidasa tipo fagocito, que en el miocito requiere la participación de Rac1 y Rap, es inhibida por las estaninas produciendo menos estrés oxidativo y así menos probabilidad de un ACV.
 

Referencias

• http://computo.sid.unam.mx/Bioquimica/PDF/2005/02/d_37_38_EDITORIAL.pdf 
• http://www.lineaozono.com.ar/estoxi.html

Relacion de la transcripcion con el ACV

Investigaciones con celulas madre se han centrado en neuronas terapeuticas que reparan los tejidos dañados cuando se ve obstruido el flujo de oxígeno al cerebro por un coágulo o la ruptura de un vaso.

Los astrocitos se consideran células limpieza pero segun cientificos pueden proteger el tejido cerebral y reducir la incapacidad causada por accidentes cerebrovasculares y trastornos de isquemia cerebral.

Un equipo comenzó utilizando un factor de transcripción (una proteína que activa los genes) conocido como Olig2 para diferenciar las células madre embrionarias humanas en astrocitos. Esto generó un tipo de astrocito desconocido hasta el momento, denominado Olig2PC-Astros.

Se experimento con astrocitos para ver si protegian a neuronas del estrés oxidativo, que es muy importante en lesiones cerebrales provocadas por el ACV. Se determinaron que el Olig2PC-Astros tenía mayores efectos antioxidantes, ademas el Olig2PC-Astros protege a neuronas del estrés oxidativo además de reconstruir los circuitos neurales que mejoran el aprendizaje y la memoria

Referencias

• http://www.ucdmc.ucdavis.edu/publish/news/newsroom/8047/?p=spanish

Epigenetica de un ACV

El principal factor de riesgo para la presencia de IAM y ACV de cualquier tipo es la obesidad.
En el resto del mundo la principal causa para la presencia de estos problemas es el aumento de las concentraciones plasmáticas del colesterol total y del LDL y la hipertencion arterial.
La producción de de angiotensina en los adipositos segun estudios puede ser el mecanismo de adaptación epigenetico (sobre-expresión o silenciamiento de genes que regulan síntesis de proteínas a través de procesos de metilación y alteración de histonas en la cromatina, sin necesidad de cambios en el ADN) que utilizó el ser humano cuando tuvo necesidad de ahorrar energía y agua que le permitieran mantenerse vivo durante los largos periodos de ayuno, y que además le mantuvieran en un estado de alerta inflamatoria para defenderse de las infecciones.
  

  Referencias:

• http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0120-56332010000500001&script=sci_arttext