domingo, 8 de diciembre de 2013

Terapia genetica y celular para el ACV

Terapia Genética
Las células más vulnerables del cerebro son las neuronas que responden a la presencia de glutamato durante el ACV produciendo incapacidad de limpiar el mismo y producen lesiones importantes. Mediante Terapia Génica se han puesto neuronas de rata a un virus herpes que porta el gen codificante de una proteína que acarrea moléculas de glucosa a través de la membrana celular. Estas proteínas se expresaron y aumentaron el nivel de glucosa en el interior de las neuronas. En un paciente que sufriera una crisis neurológica, un tratamiento de este tipo incrementaría la absorción de glucosa, que proporcionaría a las neuronas energía extra para el transporte activo del exceso de calcio y glutamato fuera de las células involucradas y se puede reducir asi la lesión causada por el ACV


Terapia con Células 
Las células madre (células no especializadas de la médula ósea, de la sangre del cordón umbilical o de embriones humanos que pueden convertirse en células con funciones específicas han sido exploradas como terapias potenciales para el ACV. En uno de los estudios actuales, 120 pacientes de ACV moderadamente afectados que tenían de 18 a 75 años de edad se dividieron en dos grupos, la mitad recibió una infusión intravenosa de células madre tomadas de sus caderas, y la otra mitad fungió como control.
Este estudio mostró mejoras marcadas en las actividades diarias, como comer, vestirse y el movimiento además los pacientes parecieron tolerar los tratamientos con seguridad en los experimentos, sin efectos nocivos, señalaron los autores de los estudios.

  Referencias 

domingo, 1 de diciembre de 2013

Ejemplo de transgénico (ventajas y desventajas)

Animales transgenicos

Poseen un gen que no les pertenece. La forma más sencilla para generar un animal transgénico es la que involucra el aislamiento del gen que se quiere introducir
Para lograr que todas las células del organismo expresen este nuevo gen, incorporamos dicho gen en un embrión en estadio de cigoto. Una vez seguros que el embrión incorporó el transgén, implantamos el embrión en un animal receptivo, que actúa como madre (en un procedimiento similar al de fertilización in vitro).


La creación de animales transgénicos presenta nuevas oportunidades, pero también crea nuevos desafíos. Entre las primeras está la posibilidad de estudiar la función de ciertas proteínas, incluidas algunas causantes de enfermedades humanas. Uno de los mayores problemas es la inserción al azar de los genes deseados.



Cabras transgénicas portadoras de un gen humano
 Referencias

domingo, 24 de noviembre de 2013

ADN recombinante en el ACV

Los agentes trombolíticos se utilizan para tratar un ACV agudo, mientras que éste ocasiona un bloqueo arterial. Estos medicamentos detienen el accidente cerebrovascular disolviendo el coágulo de sangre que está bloqueando el flujo de la sangre al cerebro.

 
Alteplasa

Se obtiene mediante la técnica de ADN recombinante utilizando una línea celular ovárica de hámster chino y trata enfermedades causadas por la formación de coágulos de sangre dentro de los vasos sanguíneos. Debe administrarse durante las tres horas posteriores a la presentación de los primeros síntomas una inyección inicial de parte de la dosis en una vena y perfusión del resto de la dosis durante los 60 minutos siguientes


Eritropoyetina humana recombinante


La administración sistémica de EPO se vio correlacionada con una normalización rápida del flujo sanguíneo cerebral y una reducción del número de neuronas necróticas segun estudios
Un reciente ensayo clínico en humanos con accidente cerebro vascular isquémico pudo corroborar, que la recuperación neurológica fue más rápida en los pacientes a los cuales se les administró EPO y el tamaño del infarto también se vio reducido, en las tomografías evolutivas, en relación con el grupo control.

Referencias


domingo, 17 de noviembre de 2013

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza


En muchas infecciones virales las secuencias de ADN viral se incorporan a uno de los cromosomas de la célula huésped

La célula replica el ADN viral incorporado junto con el resto de su ADN cada vez que se divide la célula
Cuando se producen nuevos virus a partir del ADN incorporado, estos pueden integrar por error genes humanos en el genoma del virus y se crea un virus recombinante

 Referencias



domingo, 10 de noviembre de 2013

Tecnica de hibridacion en ACV


Hemos empleado la hibridación in situ y microdisección con el tiempo real de RT-PCR para investigar la expresión y el papel que cumple 21-microARN (miR-21) después de un ACV

La hibridación reveló que el miR-21 hizo una regulación positiva de expresión en las neuronas de la zona límite isquémica, y el análisis cuantitativo en tiempo real de RT-PCR reveló que el accidente cerebrovascular aumentó los niveles de miR-21 aproximadamente tres veces en las neuronas aisladas a partir de la zona de frontera isquémica


Según datos científicos la sobreexpresión de miR-21 protege la muerte neuronal isquémica. Estos nuevos hallazgos sugieren que el miR-21 puede ser una molécula terapéutica atractiva para el tratamiento del accidente cerebrovascular.

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domingo, 3 de noviembre de 2013

Reaccion en cadena de la polimerasa en un ACV


Los microARN proporcionan un control postranscripcional de la expresión génica y demuestran extensos cambios miARN después de la isquemia cerebral
Desde HSP70 y BCL2 reguladora de apoptosis son los principales protectores contra la muerte celular inducida por el estrés, hemos identificado un miRNA que podrían influir en estas proteínas clave.

miR181 y la lesión cerebral isquémica
Niveles de miARN fueron evaluados por cuantitativos RT-PCR y los niveles de mRNA por RT-PCR
En respuesta a accidentes cerebrovasculares miR-181 aumento en el núcleo, donde mueren las células, pero disminuyo en la penumbra, donde las células sobreviven
Los niveles de miR-181 cambian en respuesta a un accidente cerebrovascular y los niveles de manipulación de miR-181 cambia el volumen del infarto. Reducción de los niveles de miR-181 se asocian con un aumento de GRP78 y Bcl2 y protección de lesión isquémica in vivo e in vitro
En conclusión las miRNAs pueden proporcionar una nueva estrategia terapéutica para la protección de un derrame cerebral.

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Muestra biologica que se recoge para detectar el ACV y pasos para la extraccion de acido nucleico a partir de la muestra

Para este tipo de exámenes específico se recoge una muestra de sangre
La técnica de amplificación de ADN mediante la reacción en cadena de la polimerasa es una técnica que consiste en tratar de replicar una y otra vez un mismo fragmento de ADN

Etapas en la extracción de ADN

1.Lisis de las células
Las sales caotrópicas ayudan a romper la estructura tridimensional de macromoléculas como las proteínas o los ácidos nucleicos consiguiendo su desnaturalización  

2.Degradación de la fracción proteica asociada al ADN
Se consigue mediante la adición de una proteasa 

3.Purificación
Consta de 3 fases:
  • Precipitación del ADN: El ADN es insoluble en alcohol, por lo que se puede precipitar etanol frío o isopropanol y recuperar mediante una centrifugación.
  • Lavado del pellet: Se realiza con alcohol frío volviendo a centrifugarse
  • Recuperación: El sedimento se puede resuspender en agua o tampón Tris Tras sersecado completamente
La confirmación de la presencia de ADN se lleva a cabo mediante electroforesis en un gel
de agarosa y posterior tinción con bromuro de etidio y observación con luz UV
 
Estos tres pasos constituyen un ciclo. La repetición de este ciclo unas 40 veces, por ejemplo, permite obtener, como resultado de un experimento de amplificación, millones de copias del fragmento de interés.

Referencias
 

domingo, 20 de octubre de 2013

Relacion de la traduccion con el ACV



Para la producción de un ACV tiene que haber un estrés oxidativo y según estudios clínicos la estanina reduce el mismo, haciendo que la incidencia de Insuficiencia cardiaca y la isquemia cerebrovascular sea menos probable
A nivel molecular las estaninas inhiben la síntesis de mevalonato, este produce moléculas isoprenoides como el FPP y GGPP que sirven como etiquetas lipídicas para la modificación postraduccional de muchas proteínas inclu
yendo la subgama de proteínas G y pequeñas proteínas unidoras de GTP (Ras, Rho, Rab, Rac, Ralo Rap). Las proteínas Ras y Rho son los principales sustratos de modificación postraduccional por prenilacion. La producción de radicales de oxigeno NADPH oxidasa tipo fagocito, que en el miocito requiere la participación de Rac1 y Rap, es inhibida por las estaninas produciendo menos estrés oxidativo y así menos probabilidad de un ACV.
 


Referencias